Transferencia de energía de resonancia
Microscopía de Transferencia de Energía de Resonancia de Fluorescencia (FRET)Home/ Learn/ Microscopy Resource Center/ Microscopy Primer/ Specialized Microscopy Techniques/ Fluorescence/ fret/ Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) Microscopy – Introductory Concepts
Brian Herman y Victoria E. Centonze Frohlich – Departamento de Biología Celular y Estructural, Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Texas, 7703 Floyd Curl Drive, San Antonio, Texas 78229.Joseph R. Lakowicz – Center for Fluorescence Spectroscopy, Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Maryland and University of Maryland Biotechnology Institute (UMBI), 725 West Lombard Street, Baltimore, Maryland 21201.Thomas J. Fellers and Michael W. Davidson – National High Magnetic Field Laboratory, 1800 East Paul Dirac Dr., The Florida State University, Tallahassee, Florida, 32310.
Energía de resonancia aromática
ResumenLos recientes avances en la transferencia de energía por resonancia de fluorescencia han dado lugar a mejoras cualitativas y cuantitativas en la técnica, incluyendo una mayor resolución espacial, rango de distancia y sensibilidad. Estos avances, debidos en gran medida a los nuevos colorantes fluorescentes, pero también a los nuevos métodos ópticos e instrumentación, han abierto nuevas aplicaciones biológicas.
Figura 1: La FRET basada en GFP se utilizó para medir los cambios conformacionales en la miosina tras la unión e hidrólisis del ATP.Figura 2: Construcciones FRET para medir el calcio intracelular.Figura 3: Cambios conformacionales en una kinesina marcada con GFP con cisteína. Figura 4: Transferencia de energía por resonancia basada en lantánidos.Figura 5: Estructura y mediciones de transferencia de energía por resonancia basada en lantánidos de un canal iónico controlado por voltaje.Figura 6: La imagen de vida de fluorescencia FRET puede utilizarse para localizar la posición de biomoléculas fosforiladas en una célula.
Nat Struct Mol Biol 7, 730-734 (2000). https://doi.org/10.1038/78948Download citationShare this articleAnyone you share the following link with will be able to read this content:Get shareable linkSorry, a shareable link is not currently available for this article.Copy to clipboard
Energía de resonancia del indol
En química, la resonancia, también llamada mesomerismo, es una forma de describir el enlace en ciertas moléculas o iones poliatómicos mediante la combinación de varias estructuras contribuyentes (o formas,[1] también conocidas como estructuras de resonancia o estructuras canónicas) en un híbrido de resonancia (o estructura híbrida) en la teoría del enlace de valencia. Tiene un valor especial para analizar los electrones deslocalizados cuando el enlace no puede expresarse mediante una sola estructura de Lewis.
El híbrido de resonancia representa la molécula real como el “promedio” de las estructuras contribuyentes, con longitudes de enlace y cargas parciales que toman valores intermedios en comparación con los esperados para las estructuras de Lewis individuales de los contribuyentes, si existieran como entidades químicas “reales”[3] Las estructuras contribuyentes difieren sólo en la distribución formal de los electrones a los átomos, y no en la densidad de electrones o espín real física y químicamente significativa. Aunque las estructuras contribuyentes pueden diferir en los órdenes de enlace formal y en las asignaciones de carga formal, todas las estructuras contribuyentes deben tener el mismo número de electrones de valencia y la misma multiplicidad de espín[4].
Fórmula de la energía de resonancia
Las mediciones de la eficiencia de FRET pueden utilizarse para determinar si dos fluoróforos se encuentran a cierta distancia el uno del otro[5]. Estas mediciones se utilizan como herramienta de investigación en campos como la biología y la química.
La FRET es análoga a la comunicación de campo cercano, ya que el radio de interacción es mucho menor que la longitud de onda de la luz emitida. En la región de campo cercano, el cromóforo excitado emite un fotón virtual que es absorbido instantáneamente por un cromóforo receptor. Estos fotones virtuales son indetectables, ya que su existencia viola la conservación de la energía y el momento, por lo que la FRET se conoce como un mecanismo sin radiación. Se han utilizado cálculos electrodinámicos cuánticos para determinar que la transferencia de energía sin radiación (FRET) y la radiativa son las asíntotas de corto y largo alcance de un único mecanismo unificado[6][7][8].
La eficiencia de FRET depende de muchos parámetros físicos [16] que pueden agruparse como 1) la distancia entre el donante y el aceptor (normalmente en el rango de 1-10 nm), 2) el solapamiento espectral del espectro de emisión del donante y el espectro de absorción del aceptor, y 3) la orientación relativa del momento dipolar de emisión del donante y el momento dipolar de absorción del aceptor.